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尊龙凯时:A673人骨尤文肉瘤细胞的STR鉴定分析

来源:公冶政菡 日期:2025-08-02

尊龙凯时细胞培养条件:气相配比为95%空气与5%二氧化碳,培养温度保持在37℃。人横纹肌肉瘤细胞A-673(STR)是一种来源于人类的横纹肌肉瘤细胞系,广泛应用于癌症研究、肿瘤生物学以及药物筛选等领域。该细胞系经过短串联重复序列(STR)分析进行身份认证,确保其遗传特征的稳定性与实验的可重复性,适合用于体外模拟横纹肌肉瘤的行为和分子机制的研究。A-673细胞源自一名15岁女性,其在软琼脂介质中可形成克隆,并能在接受免疫抑制血清处理的小鼠中致瘤。此细胞系携带四个以上的标志染色体,以及一个额外的F染色体和两个异常的B染色体。

尊龙凯时:A673人骨尤文肉瘤细胞的STR鉴定分析

尊龙凯时细胞传代推荐方法如下:首次传代建议以1:2的比例进行。具体流程为:在培养瓶中弃去培养上清,用不含钙镁的PBS缓和洗涤细胞1-2次;然后加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,显微镜下观察细胞的消化状态。当细胞大部分变圆并脱落时,迅速取回培养瓶,轻轻敲打以终止消化,随后添加超过5ml的完全培养基;接着轻轻吹打细胞使其完全脱落,吸出后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM下离心5分钟,弃去上清,加入1-2ml的完全培养基重悬;最后按照1:2的比例分瓶传代,补充新的完全培养基至每瓶5-8ml,放入37℃、5% CO2的细胞培养箱进行培养。

对于悬浮细胞传代,可以采用半换液法或离心换液法。半换液法是让培养瓶竖直静置1小时,轻轻吸出3ml培养基,随后补充3ml的新鲜完全培养基;如果发现培养基颜色变化缓慢,可以直接添加500ul左右的FBS。在传代时,建议直接补充5ml培养基并分为两个培养瓶,通常在经过3次这样的传代后可进行一次离心传代以去除死细胞。离心换液法则需将细胞悬液收集至离心管中,在1000RPM下离心5分钟,弃去上清后补充1-2ml培养液重悬,再按1:2的比例转移至新的T25瓶中,添加经过规范配置的新的完全培养基,确保细胞的生长活力,后续传代应按实际情况,以1:2至1:5的比例进行。

尊龙凯时细胞冻存步骤如下:当细胞生长至覆盖培养瓶80%时,弃去培养液并用PBS清洗一次;接着加入约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,显微镜下观察细胞的状态,待细胞收缩变圆后加入5ml的完全培养基以终止消化,轻轻吹打使其脱落,转移至离心管进行离心;随后,将沉淀细胞与1ml的无血清冻存液混匀,转移至冻存管中;最后将冻存细胞直接放入-80℃冰箱保存,若后续需转入液氮罐,则需先在-80℃冰箱中放置至少24小时。

复苏细胞时,从液氮中取出冻存管后快速置入37℃水浴中解冻,擦拭外壁后将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管,进行离心并重悬,接种至T25培养瓶中,放入37℃、5% CO2的培养箱进行培养,次日则需更换为新鲜的完全培养基。

注意事项:在运输过程中,细胞脱落是正常现象,如果脱落较多,可以将所有培养液收集至离心管中,离心后处理沉淀细胞,以确保细胞的活力和状态。同时,客户需在收到细胞后的指定时间内反馈实验结果,以便处理任何可能出现的问题。细胞状态的问题按不同标准进行区分,确需重发的情况需与技术人员沟通,确保合法合规。

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