β-葡萄糖醛酸苷酶（CAS号: 9001-45-0）的特性与活性测定

尊龙凯时为您介绍一种重要的生物酶——β-葡萄糖醛酸苷酶。其外观为固体，颜色呈浅白至浅棕。该酶的EC号为32131，其比活性范围介于1000000至5000000 U/mg蛋白质之间。

根据定义，一单位酶活性被指为在37°C下、pH 6.8的条件下，能够每小时从酚酞葡萄糖醛酸中释放出10微克酚酞所需的酶量。其分子量约为290 kDa（四聚体）和68 kDa（单体），最佳pH值在60至70之间。

活性测定方法

活性测定分为几个步骤：

步骤一：酶溶解

首先，将浓度为2 mg/mL的酶溶解于冷却的0.15 M氯化钠溶液中。测定时需将酶稀释至浓度在0.25至2 mg/mL之间。

步骤二：试剂准备

接着，将以下试剂加入一系列编号试管中（其中一个试管用作空白对照）：

• 0.1 M醋酸钠，pH 4.5 - 0.8 mL
• 0.01 M酚酞葡萄糖醛酸，pH 6.8 - 0.1 mL

在37℃水浴中孵育5分钟以达到温度平衡。随后，每隔一段时间向每个试管中添加0.1 mL的酶稀释液，而空白对照中加入的是0.1 mL水，并进行30分钟的孵育。

步骤三：反应终止

然后加入50 mL的0.2 M甘氨酸、0.2 M NaCl，pH 10的溶液以终止反应。最后，从水浴中取出反应体系，冷却至室温，并测量与空白样品对照的A540值。

结果计算

通过绘制标准曲线，可以计算出每小时从酚酞葡萄糖醛酸中释放1μmol酚酞所需的酶量（mg），这就是该酶活性的量化结果。

了解β-葡萄糖醛酸苷酶的特性及其活性测定是生物医药领域研究的重要组成部分，尊龙凯时致力于为科研工作者提供最优质的生物试剂和支持。